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尊龙凯时昆虫摇蚊谷胱甘肽转移酶GST Elisa试剂盒实验流程

发布时间:2025-03-07   信息来源:屠荷霭

尊龙凯时的昆虫摇蚊谷胱甘肽转移酶(GST)ELISA试剂盒仅供科学研究使用,严禁用于医学诊断。以下是试剂盒的使用说明。

尊龙凯时昆虫摇蚊谷胱甘肽转移酶GST Elisa试剂盒实验流程

检测原理

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)进行检测。首先在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中依次加入样品、标准品及HRP标记的检测抗体。经过适当的温育和彻底洗涤后,使用底物TMB进行显色。在过氧化物酶的催化下,TMB由蓝色转变为最终黄色,颜色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度成正相关。在450nm波长下,通过酶标仪测定吸光度(OD值),从而计算样品浓度。

样品收集与处理

1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作时避免细胞刺激。收集血液后,进行3000转/分钟的离心10分钟,快速小心地分离血清与红细胞。

2. 血浆:应用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,进行3000转/分钟的离心30分钟,取上清。

3. 细胞上清液:3000转/分钟离心10分钟,以去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织与适量的生理盐水混合并捣碎,3000转/分钟离心10分钟取上清。

5. 保存:若样本未能及时检测,应分装成一次用量并在-20℃冷冻保存,避免反复冻融,解冻时应在室温下确保样品均匀充分。

操作注意事项

试剂盒包含标准品(S0-S5),其浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。

试剂的准备:20×洗涤缓冲液需用蒸馏水按1:20稀释,即将1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

结果判断

绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作为横坐标,对应的OD值作为纵坐标,绘制出标准品的线性回归曲线,并根据曲线方程计算各样本的浓度值。

本试剂盒的性能仅供研究参考,使用时请遵循相关指南和操作步骤。

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